- 基于Nanopore测序的真菌基因组组装,是采用多种拼接软件和方法寻找最优基因组组装策略,构建高质基因组contig序列,两轮Racon纠错后,用二代数据进行两轮Pilon纠错,得到近染色体水平的真菌基因组准完成图。
Sample |
Genome length |
Contigs |
N50 |
Min |
Max |
M01 |
35,285,615 |
8 |
4,119,573 |
3,221,876 |
7,819,315 |
M02 |
8,965,027 |
8 |
1,300,838 |
41,678 |
1,515,373 |
M03 |
39,061,637 |
8 |
5,956,987 |
39,572 |
6,694,482 |
M04 |
37,800,384 |
9 |
5,335,048 |
39,069 |
7,000,358 |
M05 |
33,306,468 |
10 |
4,615,082 |
57,351 |
9,442,567 |
M06 |
51,186,472 |
15 |
5,967,548 |
59,860 |
7,014,649 |
实测案例
注:M01、M02组装出的染色体条数与前人报导、核型分析一致,已达到完成图级别。
真菌基因组准完成图的优势
能跨越高重复区域和高复杂区域,解决了高重复、高杂合基因组的组装难题。
基因组组装指标实现从Kb到Mb的跨越,得到近染色体水平的准完成图。
可以直接检测到甲基化修饰信息,对于表观遗传学的研究有重要意义。
文献推荐
Recent Asian origin of chytrid fungi causing global amphibian declines[J]. ence, 2018, 360(6389):621.
Suresh P , Hiroshi H , Ishijima S A , et al. Utilization of Hybrid Assembly Approach to Determine the Genome of an Opportunistic Pathogenic Fungus, Candida albicans TIMM 1768[J]. Genome Biology and Evolution, 2018(8):8.
Cui C , Herlihy J H , Bombarely A , et al. Draft Assembly of Phytophthora capsici from Long-Read Sequencing Uncovers Complexity[J]. Molecular Plant-Microbe Interactions, 2019, 32(12).
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1. K-mer 是什么,有什么作用?
K-mer 是指一段长度为 K bp 的序列。从一段连续序列中迭代地选取长度为 K 个碱基的序列,若序列的长度为 L,K-mer 长度为 K,那么可以得到 L-K+1 个 K-mer。
2. 测序深度建议是多少?
真菌基因组denovo测序都是整体大于100X以上的测序深度。
3. 二代比对率一般多少为佳?
二代比对率一般大于90%,认为基因组组装较好。
4. BUSCO 评价一般多少为佳?
BUSCO评价一般大于90%,认为基因组组装较好。
5. 全基因组共线性分析具体有什么作用,用来说明问题?
共线性指的是遗传学中的基因连锁关系,是不同物种染色体上同源基因以相同顺序排列的现象。两个物种之间的共线性程度可以作为衡量他们之间进化距离的尺度,可以知道物种间的亲缘关系。
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