文献解读|纵向、多平台宏基因组产生高质量基因组集,并构建奶酪群落离体培养模型
简介
奶酪微生物组是研究微生物相互作用的模型之一,本文对三种洗浸奶酪成熟的多时间点、多平台宏基因组及分离菌株展开了研究,揭示了奶酪中微生物演替及质粒、噬菌体-宿主关联,并构建奶酪群落离体培养模型,为进一步研究奶酪微生物组提供了丰富的资源。
英文标题:Longitudinal, Multi-Platform Metagenomics Yields a High-Quality Genomic Catalog and Guides an In Vitro Model for Cheese Communities
中文标题:纵向、多平台宏基因组产生高质量基因组集,并构建奶酪群落离体培养模型
发表期刊:mSystems
影响因子:6.4
发表时间:2023年1月9日
作者及单位:Christina C. Saak,加利福尼亚大学圣迭戈分校
技术路线
部分主要结果
1. 基于扩增子方法的群落演替展示
基于主成分分析表明,不同奶酪在最早的采样时间点高度相似,但在整个陈化过程中沿着可重复的轨迹发生分化,变形菌门迅速接管并主导了初期以厚壁菌门为主的细菌群落,真菌在整个成熟过程中均以酵母菌为主,随着时间推移Hypocreales在奶酪A和C的群落中可重复建立。
2. 基于三代宏基因组的分类学分析
三种奶酪都以细菌为主,真菌仅占一小部分,在成熟结束时更加明显。与扩增子测序一致,基于三代宏基因组的分类学揭示了所有三种奶酪之间共享/特有的属,如Psychrobacter(三种奶酪共有)/ Alcaligenes(奶酪C特有)。
3. MAG结果分析
在奶酪A中,17个高质量MAG中有12个是单contig且成环的,有1个是特有的。奶酪C中,37个高质量MAG中有19个是单contig且环状的,24个是特有的。对于奶酪B,11个高质量的MAG中有4个是单contig且环状的,27个高质量基因组(含16个分离株基因组)中8个是特有的。
4. 病毒、质粒与宿主的关联
对于奶酪A、B、C,分别有7、1和11个MGE与多个MAG相关,绝大多数MGEs在初始分箱中没有与推定的宿主相关联。一种MGE(质粒s673.ctg001008l_6,标*),在两个不同的时间点与来自奶酪A的两个不同MAG相关,推测是HGT事件。
5. Psychrobacter泛基因组分析
鉴定得到1405个核心基因,基于单拷贝核心基因的系统发育树发现存在按环境进行聚类,说明Psychrobacter属可能有环境特异性基因集。相较于其他环境,奶酪来源的基因富集在Fe获取、VI型分泌系统等相关基因。
针对来自奶酪B的8个基因组进行泛基因组分析,得到每个基因组特有一组“Cloud”基因簇、在2-7个基因组中含有的“Shell”基因簇、8个基因组共有的“Core”基因簇。氨基酸代谢和翻译等中枢代谢过程在Core基因簇中最为普遍,而Cloud组富含防御机制和可移动元件(噬菌体和转座子)相关基因。
6. 离体群落重建
选择16株单菌进行离体群落构建,第7、21天的宏基因组分析表明CCS169在第7天丰度最高,CCS164相对丰度在第21天增加。同时重建缺乏G. geotrichum的群落,发现G. geotrichum的去除有利于放线菌的生长,而不是变形菌。缺乏放线菌的群落中Psychrobacter依然占主导地位,且增加到了93-95%。
小结
本研究展示了配对的宏基因组数据和离体培养系统,可以用作研究奶酪微生物组内部动态及相关功能的假设平台。
参考文献:
Saak CC, et al., Longitudinal, Multi-Platform Metagenomics Yields a High-Quality Genomic Catalog and Guides an In Vitro Model for Cheese Communities. mSystems. 2023.